1.強(qiáng)心作用:蟾毒配基類和蟾蜍毒素類化合物均有強(qiáng)心作用,但蟾毒配基類化合物作用更為明顯,其化學(xué)結(jié)構(gòu)與強(qiáng)心作用有一定的關(guān)系。對貓離體心臟乳頭肌標(biāo)本,蟾毒靈及日蟾毒它靈的強(qiáng)心作用的最低有效濃度為10(-8)g/ml;脂蟾毒配基、華蟾毒精的強(qiáng)心作用的最低有效濃度為10(-7)g/ml。華蟾毒與化蟾毒精的作用相似,以適宜濃度灌注蛙心,可使其停止于收縮期,給麻醉貓、狗靜脈注射引起心博減慢,收縮振幅變大,心律不整,繼而心動過速而死亡;在麻醉狗所得的心電圖呈現(xiàn)P-R間期延長、心室率變慢、異性節(jié)律、期外收縮、束枝傳導(dǎo)阻滯、T波變平或倒置,繼而室性心動過速,室性纖維而死亡;認(rèn)為蟾毒配基對心臟的作用系通過迷走神經(jīng)中樞或末梢,并可直接作用于心肌,與洋地黃相比,可能因無糖基存在,蟾毒配基與蟾毒的強(qiáng)心作用較弱并缺乏持久性,因此無積蓄作用,亦有報告精氨酸能延長其強(qiáng)心作用。六神丸的強(qiáng)心作用提示,它能加強(qiáng)心肌功能,隨著劑量的變化而呈現(xiàn)反向轉(zhuǎn)向的調(diào)節(jié)效應(yīng),對改善局部組織和修復(fù)是有益的。實驗證明,蟾毒配基及蟾毒的強(qiáng)心作用主要表現(xiàn)在增大心肌收縮力,增加心博出量,減低心率,消除水腫與呼吸道困難。在日本它主要作為呼吸興奮劑用于臨床,而在我國以興奮呼吸、升壓藥物用于臨床。它增強(qiáng)心肌收縮力的作用不是反射性的,而是直接作用于心肌細(xì)胞的結(jié)果,多數(shù)認(rèn)為蟾毒配基能加強(qiáng)心肌收縮力是由于蟾毒配基抑制心肌細(xì)胞膜上的Na+-K+-ATP酶,從而使心肌細(xì)胞內(nèi)的Na+濃度相對增高,鈣離子則通過 Na+-Ca2+交換而進(jìn)入心肌細(xì)胞、結(jié)果使心肌收縮力加大。亦有實驗證明,蟾酥能增加人體單核白細(xì)胞的環(huán)磷腺苷的水平,而由于環(huán)磷腺甙的增加,提高心肌磷酸化酶激酶的活性,在磷酸化酶激酶的作用下,使無活性的磷酸化酶b轉(zhuǎn)變成有活性的磷酸化酶a,因此促進(jìn)糖元分解,促使產(chǎn)生更多的ATP,ATP作為心肌收縮的原動力,使心肌充分發(fā)揮作用。
2.對Na+、K+ -ATP酶抑制作用:蟾蜍皮膚分泌液對Na+、K+ -ATP酶有強(qiáng)烈的抑制作用,這是由于Na+ K+ -ATP酶位于細(xì)胞膜上,Na+在膜內(nèi)側(cè)與酶結(jié)合,促進(jìn)酶與ATP反應(yīng)、使酶在膜內(nèi)側(cè)磷酸化,這時酶產(chǎn)生構(gòu)象變化,與鈉結(jié)合的部位轉(zhuǎn)向膜外側(cè);磷酸化的酶對Na+親和力降低,而對K+親和力增高,因而在膜外側(cè)釋放Na+,而與K+結(jié)合:K+與磷酸化的酶結(jié)合后,促進(jìn)酶的脫磷酸化,因而酶的構(gòu)象又產(chǎn)生變化,與K+結(jié)合的部位轉(zhuǎn)向膜內(nèi)側(cè),使K+在膜內(nèi)側(cè)被釋放。這樣,在Na+、K+、Mg2+的參與下,Na+被排出,K+被帶入細(xì)胞,其反應(yīng)可以表示如下:ATP+酶 Na+、Mg2+酶-p+ADP;酶-P+H2O K+、Mg2+ 酶+Pi而蟾蜍皮膚的分泌液對Na+、K+ -ATP酶的作用在于酶的磷酸化中間物(酶-P),其分泌液中的蟾毒配基或蟾蜍毒素類化合物與K+競爭性與酶-P結(jié)合,而酶-P與蟾毒配基或蟾蜍毒素結(jié)合后,不再與K+結(jié)合,因而使酶-P穩(wěn)定,不易水解,使Na+、K+ -ATP酶不能發(fā)揮正常的作用,其活性受到抑制。用蟾毒配基和蟾蜍毒素對腸鼠的Na+、K+ -ATP 酶的抑制作用進(jìn)行了實驗。此外,除強(qiáng)心作用外,蟾酥的表面麻醉作用的機(jī)理也可能與它們抑制Na+、K+ -ATP酶有關(guān)。
3.對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的興奮作用:蟾酥在短暫的降壓之后引起血壓升高,實驗證明,短暫降壓作用是由于對迷走神經(jīng)的興奮,而升壓作用則系直接作用于心肌。脂蟾毒配基、蟾毒靈及華蟾毒精等都具有顯著的呼吸興奮和升壓等中樞興奮作用,其中尤以脂蟾毒配基臨床上已作為呼吸興奮劑使用,商品名Respigon。脂蟾毒配基對小鼠的半數(shù)驚厥劑量(CD50)及半數(shù)致死量分別為10.52mg/kg及20.80mg/kg(LD/CD=1.98),脂蟾毒配基的LD/CD值比其它呼吸興奮劑如尼可剎米、戊四氮及山梗菜堿等為大。脂蟾毒配基對病人的呼吸中摳及血管運動中樞有直接的興奮作用,還有強(qiáng)心、升高血壓,且作用迅速持久,臨床上用于中毒、溺水、昏迷引起的呼吸衰竭、休克、呼吸困難及氣逆等。
4.升壓作用:以前認(rèn)為蟾酥的升壓作用主要來自于蟾酥的強(qiáng)心作用,即對心臟的直接作用,現(xiàn)在認(rèn)為蟾酥的升壓作用主要來自于周圍血管的收縮,部分來自它的強(qiáng)心作用。從蟾毒色胺靜脈注射能提升血壓,局部應(yīng)用時對血管無收縮作用這一點來看,說明其作用是通過兒茶酚胺的釋放來實現(xiàn)的。另有實驗表明,蟾酥與山莨菪堿適當(dāng)合用,血管阻力基本不變,血壓仍然升高,同時才可使脈壓變大。提示升壓作用除血管因素外,還可能與每搏輸出量有關(guān)。
5.局麻作用:蟾酥及所含成分有局麻作用80%蟾酥醇提物有表面麻醉作用,在兔角膜及人舌試驗,作用比狄卡因慢而持久,其中以蟾毒靈局麻作用最強(qiáng),較可卡因大30-60倍,且無刺激作用,華蟾毒精及華蟾毒它靈約為蟾毒靈的1/6;日蟾毒它靈約為1/20。0.1-0.5%華蟾毒精溶液局部應(yīng)用能引起舌頭麻木;其局麻作用點可能為感覺神經(jīng)末梢感受器,對神經(jīng)纖維作用很弱,不飽和內(nèi)酯環(huán)的存在和C3位的羥基對局麻似是必需的。蟾酥水劑表面麻醉的最低有效濃度為0.5%,其麻醉時間比同濃度的狄卡因強(qiáng)1倍。局麻作用機(jī)理與肌細(xì)胞的緩慢除極和釋放乙酰膽堿的機(jī)理有關(guān)。
6.抗腫瘤與抗幅射作用:蟾毒內(nèi)酯類物質(zhì)對小鼠肉瘤180、兔BP瘤、子宮頸癌14、腹水型肝癌等均有抑制作用。在機(jī)體能抑制人的顴上下頜未分化癌、間皮癌、胃癌、脾肉瘤、肝瘤等腫瘤細(xì)胞的呼吸。延長患精原細(xì)胞瘤、腹水癌和肝癌小鼠的生存期,試管中對白血病細(xì)胞有抑制作用。據(jù)實驗報告,華蟾素對動物移植性腫瘤有抑制作用,尤其是對小鼠肝癌有較明顯的抑制作用。蟾酥能不同程度地防治化療和放療引起的白細(xì)胞下降,對已下降者應(yīng)用蟾酥可回升,且不再下降。蟾酥制劑具有類似腎上腺素作用,能增強(qiáng)機(jī)體對放療和化療的耐受力,對X線局部照射有保護(hù)作用,可能是本品抗腫瘤的重要機(jī)制之一。蟾毒配基的抗腫癌作用,以嚏根草甙元-3醋酸對大鼠W256抑制率達(dá)75%,但治療指數(shù)低;利用美蘭氏試管法與細(xì)胞呼吸器法,研究了蟾酥與蟾皮制劑對體外白血病細(xì)胞的作用,觀察到能抑制糖酵解和細(xì)胞呼吸過程。另有報道從植物分離出與蟾毒內(nèi)酯結(jié)構(gòu)相似的強(qiáng)心甙和甙元對Hala-S3腫瘤細(xì)胞和烏本甙對艾氏腹水癌有抑制作用,這種抗腫瘤作用認(rèn)為是抑制Na+ -K+ -ATP酶使細(xì)胞內(nèi)K濃度下降,從而不能維持核酸合成所必需的K濃度所致。有人通過溶血空斑形成細(xì)胞(PFC)試驗,E-花環(huán)形成細(xì)胞(E-RFC)試驗,聚集IgG抑制 E一RFC恢復(fù)試驗以及單核、巨噬細(xì)胞吞噬功能試驗,發(fā)現(xiàn)蟾酥制劑具有增高小鼠脾臟溶血空斑形成細(xì)胞(PFC)活性率,促進(jìn)巨噬功能以及增高血清溶菌酶濃度等作用。此種增加B細(xì)胞作用,可能是蟾酥抗腫瘤的重要機(jī)制。蟾酥水溶性總成分,體外培養(yǎng)下對惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞1μg/ml濃度時仍有抑制作用。10μg/ml濃度以上對中國金倉鼠惡性轉(zhuǎn)化細(xì)胞系(BHLB4)有明顯抑制作用。1μg/ml在初加入時對BHLB4細(xì)胞有抑制作用,但很快BHLB4細(xì)胞就適應(yīng)生長。急性毒性試驗 半數(shù)致死量為60.71mg,無刺激性,不溶血,亞急性毒性試驗未見病變。認(rèn)為本品可能通過人體必需微量元素及肽類而起作用。本品優(yōu)于全蟾酥及其脂溶性成分,安全無毒。在臨床上對抗炎、抗結(jié)核、抗癌方面起到明顯療效,可代替全蟾酥。
7.抗炎作用:蟾酥甾醇類物質(zhì)能抑制血管通透性,對金黃色葡萄球菌和甲型溶血性鏈球菌感染的家兔,皮下注射蟾酥注射液9mg/kg能阻止病灶擴(kuò)散,使周圍紅腫消退,抑菌效果明顯、迅速,對一些抗生素不敏感或?qū)股匾旬a(chǎn)生耐藥性的化膿性疾患,本品亦有抑制效果。用甲醛液濾紙片法觀察到蟾酥有抑制肉芽形成的效果,其皮下注射的半效抑制量(ID50)為159mg/kg,醋酸氫化可的松的ID50為35.7mg/kg 對受醋酸刺激的組織血管通透性亢進(jìn)有抑制作用。強(qiáng)心配糖體可使血管收縮,故對燒傷及其它創(chuàng)傷,與抗感染藥合用,可收到良好的抗炎效果。并能抑制毛細(xì)血管通透性增高,減少炎性滲出,有益于消除腫脹,是否與興奮垂體。腎上腺皮質(zhì)系統(tǒng)而改善其功能有關(guān),尚需進(jìn)一步研究。另據(jù)報告,蟾酥制劑能激活小鼠腹腔游走巨噬細(xì)胞,提高其吞噬能力,已知被激活的巨噬細(xì)胞和處理抗原,又能直接殺死細(xì)菌和抑制細(xì)菌生長。
8.對平滑肌的作用:蟾酥能收縮冠狀動脈血管,減少冠脈血流量,能興奮腸管平滑肌,使其收縮振幅增大,頻率加快,阿托平與嗎啡可對抗此種作用;蟾毒精類(Bufagins)和水溶性吲哚胺類化合物能興奮兔、豚鼠離體腸管和子宮平滑肌,用國產(chǎn)蟾酥制劑作抗炎試驗時,曾使孕兔流產(chǎn),蟾酥水提液對豚鼠在體和離體支氣管均呈收縮作用,但蟾蜍季胺對狗支氣管無影響。蟾蜍甙元能使橫紋肌興奮,蟾蜍靈能部分的桔抗鎂離子的神經(jīng)肌阻斷作用,蟾蜍特尼定引起硅腹直肌收縮作用的強(qiáng)度,出現(xiàn)膜電位的改變,故為直接作用。
9.對心肌缺血的影響:體外實驗說明,蟾酥可使纖維蛋白原液的凝固時間延長,其抗凝血作用與尿激酶類似,可使纖維蛋白溶酶活性化,從而增加冠狀動脈灌流量。蟾酥對血栓形成導(dǎo)致的冠狀血管狹窄而引起的心肌梗塞等缺血性心臟障礙,能增加心肌營養(yǎng)性血流量,改善微循環(huán),增加心肌供氧。蟾酥制劑和毒毛旋花子甙K均能增進(jìn)麻醉犬的心肌收縮力及作用時間,在給藥早期,蟾酥組中各項參數(shù)上升率比毒K組明顯提高,結(jié)果提示蟾酥對心肌具有雙重正性變力效應(yīng)。實驗結(jié)果表明,蟾酥對急性心肌缺血有一定保護(hù)作用,故可用于血栓誘發(fā)的缺血性心臟障礙的預(yù)防和治療。
10.抗病原微生物:實驗報告甾醇類物質(zhì)能抑制血管通透性,對金黃色葡萄球菌和甲型溶血性鏈球菌感染的家兔,皮下注射蟾酥注射液能阻止病灶擴(kuò)散,使周圍紅腫消退,抑菌效果明顯、迅速,對一些抗生素不敏感或?qū)股匾旬a(chǎn)生耐藥性的化膿性疾患,本品亦有抑制效果。用甲醛液濾紙片法觀察到蟾酥有抑制肉芽形成的效果,對受醋酸刺激的組織血管通透性亢進(jìn)有抑制作用。
11.抗內(nèi)毒素休克:以大劑量大腸桿菌內(nèi)毒素粗制品注入狗靜脈內(nèi)造成內(nèi)毒素休克。蟾酥與山莨菪鹼均有一定的抗休克作用,二者合用(蟾山合液)可使療效明顯提高。蟾山合液的療效可能系兩者其同作用、從而較好地抑制彌散性血管內(nèi)凝血、減少纖維連結(jié)素消耗和改善血液流變性及紅細(xì)胞膜功能。由表5可知,在內(nèi)毒素注后1-6小時內(nèi)三個實驗組對動脈壓均有較好的恢復(fù)作用;但至9小時后僅有蟾山合液組明顯地高于鹽水組(P<0.05)。根據(jù)家兔與狗內(nèi)毒素休克實驗,無論從動物存活率、存活時間、輸液滴藥后動脈血壓維持程度以及股動脈血流速度來看,都是蟾山合液的療效優(yōu)于單純蟾酥或單純山莨菪堿與對照組比較,差異顯著(P<0.05)。蟾酥對內(nèi)毒素休克犬的血漿纖維素與總補(bǔ)體的含量有明顯影響。發(fā)現(xiàn)內(nèi)毒素休克犬存活時間與纖維素的基礎(chǔ)水平具有非常顯著意義,內(nèi)毒素注射后10小時血漿纖維素,總補(bǔ)體含量均減少,其中血漿纖維素減少程度,與空白對照之間差異有顯著意義。
12.對兔疫功能的影響:動物實驗證明,蟾酥制劑具有增高小鼠脾臟溶血空斑形成細(xì)胞(PFC)活性率,促進(jìn)巨噬細(xì)胞吞噬功能以及增高血清溶菌酶濃度的作用。對細(xì)胞兔疫皮試、巨噬細(xì)胞活力測定、玫瑰花結(jié)試驗、淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率均有不同程度提高。蟾酥水溶性總成分的單體分高及其免疫藥理學(xué)和分子生物學(xué)的研究,有增強(qiáng)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬功能,提高機(jī)體的非特異性免疫的作用。
蟾酥具有類似免疫或提高免疫功能的作用,可能在于整個機(jī)體功能的調(diào)節(jié),表明本品抗結(jié)核機(jī)制似與通過細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)有關(guān)。但血清免疫球蛋白G及M含量變化無明顯規(guī)律性。
13.鎮(zhèn)咳作用:據(jù)動物實驗,預(yù)先皮下注射蟾蜍色胺,對5-羥色胺噴霧引起的豚鼠氣管痙攣有明顯保護(hù)作用。對于蛋清致敏的豚鼠離體子宮或回腸,蟾蜍色胺有抗過敏作用。蟾酥煎劑對小白鼠二氧化硫所致的實驗性咳嗽,有鎮(zhèn)咳作用,但祛痰效果較差。
14.對血小板聚集功能的影響:給實驗性家兔IP蟾酥,鹽水組注入前后微量分析試劑與標(biāo)準(zhǔn)均無明顯改變(P>0.05),但蟾酥注入后較注入前差異具有顯著差異(P<0.05),并且最大聚集抑制率和聚集速度抑制率都是蟾酥組高于鹽水組。這說明蟾酥對血小板聚集程度與速度均有抑制作用。國外有報道蟾酥能減輕彌漫性血管內(nèi)凝血發(fā)生,或許也與血小板聚集釋放受到抑制有關(guān)。(《中華本草》)